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解決済みの質問

アフィニティカラムクロマトのバッファ調整について

 大学で、DNAアフィニティカラムクロマトグラフィーによる組み替えDNApolβの精製を行うのですが、その際に使用する緩衝液を作成する方法を考えています。
 しかしどうやって、モル表記の試薬からml単位でバッファを作成するのが、わかりません。塩酸をモル濃度で調整するように、物質量などから計算する物なのでしょうか?
 問題の一例としては『5×Buffer A(DTTは含まない),2M KCl,1M DTTよりBuffer A(50mM Tris-HCl ph7.6,0.1mM EDTA,1mM DTT,10%glycerol)15mlを作成せよ』というものです。
 基礎的な質問だとは思いますが、どうぞ宜しくお願い致します。

投稿日時 - 2004-09-01 09:01:43

QNo.984158

困ってます

質問者が選んだベストアンサー

濃い濃度の原液を組み合わせて薄い濃度のバッファーを作る方法がわからないということでしょうか?

でしたら、原液のモル濃度が出ていますよね?

ということは、何倍に希釈すれば目的の濃度になりますか?

たとえば、1M DTTを使って1mM DTTを15ml作るなら、
1mM / 1M = 1/1000
ですから、15mlの最終溶液に対して、その1/1000の15μlを使えばいいことになります。
(必要な量ずつ入れて、最後に水でメスアップする)

5Xというのは、5倍濃度ということでしょうから、当然、最終溶液の量の1/5量使えばいいですね。この場合は、
5*1/15で、3mlになりますね。

投稿日時 - 2004-09-01 14:35:05

お礼

ありがとうございました。大変参考になりました。

投稿日時 - 2004-09-02 23:17:02

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回答(2)

ANo.1

>モル表記の試薬からml単位でバッファを作成する
濃い溶液から薄い溶液を少量で調製したいということでしょうか?
もしそうでしたら希釈を数回に分けて行ってください。たとえば、
1M 100uLを1mLに希釈すれば100mM、
100mM 100uLを10mLに希釈すれば1mMです。

投稿日時 - 2004-09-01 09:28:46

お礼

ありがとうございました。大変参考になりました。

投稿日時 - 2004-09-02 23:18:21

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